RNAi抑制DNA甲基转移酶1的表达对胃癌细胞p16基因的影响

• 作者: 朱磊 赵军 赵国海
• 来源期刊: 中国临床药理学与治疗学
• 关键词: 胃癌 DNA甲基转移酶 RNA干扰 甲基化
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 395-399
• 页数: 5页
• 分类号: R965.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.12092/j.issn.1009-2501.2018.04.006

摘要

目的:运用RNAi(RNA interference)抑制胃癌细胞株BGC-823中DNA甲基转移酶1(DNA methylation transferase 1,DNMT1)基因的表达,当DNMT1基因沉默后观察p16基因的表达情况.方法:以DNMT1的mRNA核苷酸序列,构建siRNA质粒1、2、3和阴性对照siRNA质粒b,胃癌细胞培养后经脂质体转染.对DNMT1基因行Q-PCR检测其mRNA表达水平及Western blot检测其蛋白表达水平,确认其表达下调后筛选出最佳干扰质粒.以同样的方法检测胃癌细胞最佳干扰组、阴性对照组和空白对照组的p16基因的表达情况,以确认抑制DNMT1基因表达后对胃癌细胞p16基因的影响.结果:RNAi可有效抑制胃癌细胞株BGC-823中DNMT1基因的表达.对转染后的胃癌细胞DNMT1基因检测mRNA及蛋白表达情况,结果显示,转染siRNA2的胃癌细胞中DNMT1的表达明显低于其他转染组、阴性对照组及空白对照组(P＜0.05),由此筛选出最佳干扰质粒siRNA2.用同样的方法检测胃癌细胞最佳干扰组(siRNA2)、阴性对照组和空白对照组的p16基因表达情况.结果显示,最佳干扰组的mRNA(1.6727±0.2242)及蛋白(0.9227±0.0337)表达水平均高于阴性对照组(1.0025±0.0877)、(0.5440±0.0229)和空白对照组(0.4729±0.0940)、(0.4767±0.0774) (P＜0.05).结论:用RNAi可以抑制胃癌细胞DN-MT1基因的表达从而使p16基因去甲基化,使p16基因恢复表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国海	皖南医学院弋矶山医院胃肠外科	59	413	10.0	19.0
2	朱磊	皖南医学院弋矶山医院胃肠外科	14	38	4.0	5.0
3	赵军	皖南医学院弋矶山医院胃肠外科	27	99	4.0	9.0