Avermectin C5-O-甲基转移酶基因的克隆、序列分析及其基因置换

• 作者: 朱浩君 郑应华
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: Avermectin C5-O-甲基转移酶 基因置换 接合转移
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-5，59
• 页数: 6页
• 分类号: R978.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-8689.2003.01.001

摘要

C5-O-甲基转移酶基因(aveD)位于阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)染色体3.4kb BamHI的片段上,通过构建avermectin基因组约3.4kb BamHI片段的亚基因文库,用PCR的方法获得该基因的连锁基因C5-酮基还原酶基因(aveF),并作为探针筛出aveD的克隆子.测序后和GenBank做同源比较,结果一致.构建基因置换穿梭载体pHJ5803(pHZ1358::aveD & Amr),通过ET12567::pUZ8002属间接合转移导入S.avermitilis.放松培养后筛选出双交换重组菌株,并用PCR验证重组菌株的aveD已经破坏,将重组菌株摇瓶发酵液提取avermectin进行色谱质谱联机分析,发现重组菌株仅产生4个组分,与出发菌株的4个B组分完全一致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱浩君	华中农业大学生命科学院	5	51	4.0	5.0
2	郑应华		14	148	7.0	11.0