花生γ-生育酚甲基转移酶基因(γ-TMT)的克隆及序列分析

• 作者: 万勇善* 刘风珍* 李拴柱
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 花生 维生素E γ-生育酚甲基转移酶 基因克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 页码范围: 1856-1863
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2012.01856

摘要

γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)催化γ-生育酚转变为生物活性最高的α-生育酚,是决定植物中维生素E成分和活性的关键酶.本研究采用电子克隆与PCR相结合的方法获得了花生6个栽培品种(A. hypogaea L.)和花生区组4个二倍体野生种中γ-TMT的全长DNA序列,定名为AhgTMT;从栽培品种丰花2号中获得γ-TMT的cDNA序列,定名为AhrTMT.同一栽培品种的AhgTMT与AhrTMT的序列完全对应,说明该基因无内含子.AhrTMT编码区长1059 bp,编码352个氨基酸残基的AhTMT蛋白.AhTMT分子量为39.09 kD,等电点6.72,总平均亲水性–0.12;预测的二级结构中α-螺旋占55.40%,β-折叠占10.51%,无规则卷曲占34.09%;被定位于叶绿体,含有甲基转移酶保守的SAM结构域.AhTMT与已报道植物γ-TMT氨基酸序列的相似性为61.75%~72.80%.栽培品种的AhgTMT与A. ipaensis (BB)、A. batizocoi (BB)、A. duranensis (AA)、A. kuhlmannii (AA)4个野生种的核苷酸序列同源性分别是100%、99.91%、99.74%和95.63%.