Hydralazine逆转胃癌细胞株p16基因甲基化及增强其表达的研究

• 作者: 夏亚斌 张义胜 赵军 赵国海
• 来源期刊: 中国临床药理学与治疗学
• 关键词: 肼屈嗪 P16 甲基化 去甲基化
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 5-9
• 分类号: R965.2
• 语种: 中文

摘要

目的:通过使用甲基转移酶抑制剂肼屈嗪(Hydralazine)作用于胃癌细胞株BGC-823,观察Hydralazine对MTS1/p16基因启动子区CpG岛甲基化、p16 mRNA、p16蛋白表达及细胞增殖的影响；分析p16基因启动子区CpG岛甲基化与p16基因表达两者间的关系,以此考察胃癌细胞株BGC-823 p16基因的失活机制是否与启动子区CpG岛甲基化有关.方法:对体外培养的胃癌细胞株BGC-823进行分组实验,实验组加入水溶性的Hydralazine,浓度0、10、30、100μmol/L,对照组不加Hydralazine,96 h后对两组分别行甲基化特异性PCR法(MSP)、RT-PCR及Westernblot检测,以观察p16基因甲基化状态、mRNA、蛋白表达的变化；应用6种不同浓度的水溶性Hydralazine(0、3、10、30、100、300 μmol/L)处理胃癌细胞BGC-823,72 h后行MTT检测,以观察对细胞增殖的影响.结果:P16基因在胃癌细胞株BGC-823中,启动子区CpG岛呈高甲基化状态,mRNA及蛋白呈低水平表达.Hydralazine阻断甲基转移酶作用后,p16基因启动子区CpG岛呈去甲基化状态,Hydralazine浓度越高,CpG岛去甲基化越明显.Hydralazine阻断甲基转移酶作用后,用药后p16 mRNA表达较前明显增强(P＜0.05).Hydralazine阻断甲基转移酶作用后,用药后p16蛋白表达较前明显增强(P＜0.01).MTT检测到不同浓度的Hydralazine(0、3、10、30、100、300 μmol/L)对细胞增殖的抑制率差异有统计学意义(P＜0.05),其量效关系反映出抑癌基因p16去甲基化程度越高,对胃癌细胞株BGC-823的增殖抑制越显著.结论:P16基因动子区CpG岛甲基化是p16基因失活的重要机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国海	皖南医学院弋矾山医院胃肠外科	59	413	10.0	19.0
2	张义胜	皖南医学院弋矾山医院胃肠外科	42	180	8.0	12.0
3	夏亚斌	皖南医学院弋矾山医院胃肠外科	28	143	7.0	11.0
4	赵军	皖南医学院弋矾山医院胃肠外科	27	99	4.0	9.0