猪细小病毒LAMP检测方法的建立

• 作者: 刘业兵 宁宜宝 张磊 王琴 范学政
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 LAMP 检测方法
• 年，卷（期）: 2010,（14）
• 页码范围: 3012-3018
• 分类号: S8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.14.021

摘要

[目的]建立一种快速、敏感、特异的检测猪细小病毒(PPV)环介导等温扩增(LAMP)方法,为诊断猪细小病毒提供准确可靠工具.[方法]根据GenBank公布的PPV序列,在其保守序列区域设计了多套LAMP引物,利用LAMP Real Time Turbidimeter LA-320仪监测反应进程并筛选最佳引物、反应条件,建立了对PPV病毒DNA进行特异扩增的LAMP检测方法,并可通过加入SYBR Green Ⅰ肉眼判断结果.[结果]该方法在63℃恒温下作用45 min,PPV病毒DNA获得了高效率的特异性扩增;其检出限量为0.23 TCID50,敏感性高;在反应结束后加入SYBR Green Ⅰ肉眼判断结果,与Real Time Turbidimeter LA-320仪监测结果一致.通过对20份临床样品的LAMP检测与免疫荧光鉴定、PCR方法比对,符合率均为20/20.[结论]本研究建立的PPV LAMP检测方法具有快速、特异、灵敏,操作简单、设备要求低的特点,适合用于临床PPV快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范学政		43	501	11.0	21.0
2	王琴		59	698	14.0	23.0
3	宁宜宝		119	1253	19.0	30.0
4	刘业兵		63	419	11.0	17.0