双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗的构建及其免疫原性检测

• 作者: 关铭 南文龙 张金双 成岩 田明尧 白靓 石毅 赵翠青 金宁一 鲁会军
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 流感病毒A型 疫苗,DNA 体液免疫 细胞免疫
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 267-270
• 分类号: Q81
• 语种: 中文

摘要

目的:构建双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗,并检测其免疫原性.方法:构建共表达流感病毒H5亚型血凝素(HA)和H7亚型HA的DNA疫苗,采用间接免疫荧光法(IFA)检测目的蛋白在幼仓鼠肾细胞(BHK cell)中的表达.分为pVAX1-H5-H7、pVAX1-H5、pVAX1-H7和pVAX1空质粒对照组4组(每组15只) 进行小鼠免疫实验,并应用ELISA法检测小鼠血清抗体,流式细胞术检测小鼠脾T淋巴细胞亚群数量.结果:所构建的双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗在BHK细胞中的表达产物可激发荧光抗体产生绿色免疫荧光,且对照pVAX1空载体转染BHK细胞无免疫荧光产生.使用双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗免疫小鼠后,小鼠产生了针对H5和H7抗原的血清特异性抗体,流式细胞术检测免疫组小鼠脾T淋巴细胞亚群CD4+和CD8+的数量显著高于对照组(P<0.05).结论:成功构建的双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗可以诱导小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫应答.