MTH1基因表达的半定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 刘彦明 刘海燕 李宁 肖洪广 范婷婷 谢显功 郑君德 马红梅
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: MTH1 RT-PCR MDCK
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 1390-1392,1401
• 分类号: R446.61
• 语种: 中文

摘要

目的 建立一个检测培养MDCK细胞内MutT同源蛋白1(MTH1)基因表达的半定量RT-PCR体系.方法 细胞培养后提取总RNA,经优化RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的表达量.条带经Scion Immage软件分析并与内参基因GAPDH相比,对体系的准确性、重复性和灵敏度进行分析,然后运用本体系检测流感病毒感染后MDCK细胞内MTH1的表达.结果 扩增产物经测序分析证实与GenBank中该细胞的MTH1基因序列一致;灵敏度检测发现最低可从50 ng总RNA中检出目的 基因的表达;重复性测定发现,MDCK细胞MTH1与GAPDH灰度值比值的均值为(2.02±0.09,n=10),CV值为4.31%.结论 本方法的准确性、重复性和灵敏度均较好,可用于半定量检测培养细胞尤其是MDCK细胞内MTH1 mRNA表达量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖洪广		54	362	11.0	16.0
2	范婷婷		14	59	5.0	7.0
3	郑君德		22	157	8.0	11.0
4	李宁		21	100	6.0	9.0
5	刘彦明		3	18	2.0	3.0
6	马红梅		2	2	1.0	1.0