家蚕Bm595的表达、组织分布及亚细胞定位

• 作者: 刘立丽 吕正兵 吴祥甫 张耀洲 沈红丹 王丹 王帅玉 盛清 聂作明 舒建洪 陈健 陈剑清
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: Bm595 组织分布 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 648-654
• 页数: 7页
• 分类号: S8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.03.028

摘要

[目的]从家蚕蛹期cDNA文库中获得一条新基因Bm595,分析Bm595在家蚕体内的表达和定位情况.[方法]利用生物信息学分析Bm595序列,并构建重组表达质粒在大肠杆菌中诱导表达,以纯化的融合蛋白抗原,制各多克隆抗体.用荧光定量PCR和Western blot方法分析Bm595基因在家蚕各组织中的分布.用免疫细胞化学的方法研究Bm595蛋白的定位情况.[结果]Bm595在五龄幼虫的转录水平最高,卵中最低.Bm595在家蚕五龄幼虫各组织中的转录水平由高到低依次为:睾丸、丝腺、肠、头、卵巢、脂肪体、表皮,气管.在表达水平方面,睾丸的表达量最高,其次是丝腺和头,脂肪体有较明显的表达.以家蚕Bm5细胞进行免疫细胞化学试验,Bm595主要分布于细胞核内.[结论]在mRNA、蛋白质表达和细胞水平对Bm595进行初步表达分析和定位分析,为进一步研究该蛋白在家蚕中的功能提供重要依据.