含IL-24基因重组慢病毒表达载体的构建及其对肝癌细胞生长的抑制作用

• 作者: 史震 周峰 孙伟 张海清 汤仁仙 郑葵阳
• 来源期刊: 江苏医药
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体 白细胞介素24 肝癌
• 年，卷（期）: 2010,（19）
• 页码范围: 2300-2302
• 分类号: R392
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨白细胞介素(IL)24基因表达目的蛋白IL-24的方法,检测IL-24对肝癌细胞生长的影响.方法 自经5μg/ml植物血凝素(PHA)刺激的正常人单个核细胞(PBMCs)中提取总RNA,RT-PCR扩增出IL-24 cDNA,插入到pHAGE-CMV-MCS-IzsGreen中构建成慢病毒转移载体pHAGE-IL-24,转染HEK 293T细胞.荧光显微镜观察293T细胞中绿色荧光蛋白(GFP)表达;梯度稀释法测定病毒滴度,感染HEK 293T细胞48 h后进行RT-PCR和Western blot检测IL-24的基因和蛋白表达;MTT法检测细胞的增殖.结果 限制性内切酶检测和基因测序证实成功构建了携带IL-24基因的慢病毒表达载体,滴度为5×106TU/ml.以MOI为5.0的重组慢病毒感染靶细胞HepG2 48 h后,能够检测到外源基因IL-24的蛋白表达.IL-24能够抑制肝癌细胞的生长.结论 成功构建了含IL-24基因的慢病毒表达载体,获得的病毒能够有效感染HepG2细胞,并在其中大量表达目的蛋白;IL-24能够抑制肝癌细胞的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙伟	徐州医学院病原生物学与免疫学教研室	30	82	7.0	8.0
2	郑葵阳	徐州医学院病原生物学与免疫学教研室	74	215	8.0	10.0
3	汤仁仙	徐州医学院病原生物学与免疫学教研室	74	220	8.0	11.0
4	史震	徐州医学院病原生物学与免疫学教研室	14	33	3.0	5.0
5	张海清	徐州医学院病原生物学与免疫学教研室	4	7	2.0	2.0