兔软骨细胞与骨髓基质细胞的平面共培养:两者培养比例筛选

• 作者: Peter I.Lelkes 孙磊 杰永生 江健 綦惠 陈海燕 陈磊 陶剑锋 高新生
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 软骨细胞 骨髓基质细胞 共培养 蛋白聚糖 Ⅱ型胶原
• 年，卷（期）: 2010,（27）
• 页码范围: 4955-4959
• 分类号: R394.2
• 字数: 5323字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.27.004

摘要

背景:骨髓基质细胞一定条件下可以分化为软骨细胞,但目前还缺少将软骨与骨髓基质细胞平面共培养的深入探讨.目的:拟明确骨髓基质细胞与软骨细胞共培养时比例的选择、细胞增殖活性、软骨特异性蛋白表达的规律,用于细胞移植的最佳时间和传代次数.方法:软骨细胞与骨髓基质细胞的分离培养,传代后分为5组:单纯软骨细胞组;共培养组,软骨细胞与骨髓基质细胞7:3,5:5,3:7组;以及单纯骨髓基质细胞组.传代至第4代(G4),倒置相差显微镜观察各组细胞在不同传代时期的细胞形态,MTT实验检测细胞增殖活性,甲苯胺蓝与阿利新蓝染色,细胞免疫化学法检测Ⅱ型胶原的表达.结果与结论:共培养各组在各个时期细胞表型正常.G1～G3代细胞增殖活跃,G4代细胞增殖能力下降.共培养各组甲苯胺蓝与阿利新蓝染色以及Ⅱ型胶原表达在G2和G3代均较高.综合各指标认为,以软骨细胞与骨髓基质细胞的比例为5:5,3:7组为最佳.软骨细胞与骨髓基质细胞平面共培养,保持了软骨细胞的形态和蛋白表达特性,如进行细胞移植,选取软骨细胞与骨髓基质细胞5:5或3:7的比例为最佳.