含A(H1N1)流感病毒NP基因病毒样颗粒的构建和表达

• 作者: 孙新城 徐桂超 昌静峰 李彦霞 李智涛 王云龙 王国强
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 流感病毒A型,H1N1亚型 RT-PCR 阳性对照 病毒样颗粒 核糖核酸酶
• 年，卷（期）: 2010,（17）
• 页码范围: 3083-3086
• 分类号: R3
• 字数: 3335字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2010.17.004

摘要

目的:构建并表达含有A(H1N1)流感病毒NP基因片段并可抗RNase降解的病毒样颗粒,作为RT-PCR检测的阳性对照.方法:设计带有Nco Ⅰ、BamHⅠ酶切位点的引物克隆MS2噬菌体的装配蛋白和包膜蛋白基因,化学合成含BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点的A(H1N1)流感病毒NP基因片段,将这些基因连接到质粒载体pET-28b(+)上,转化到E.coli BL21(DE3)感受态细胞中进行表达,表达产物进行纯化,然后进行RNase攻击试验和稳定性试验.结果:获得含NP基因片段的病毒样颗粒,可抵抗RNase降解,并能在37℃稳定保存30 d.结论:该病毒颗粒稳定、安全、可靠,可作为A(H1N1)流感病毒RT-PCR检测、定量分析的有效阳性参考品.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李智涛		15	83	5.0	8.0
2	王云龙	河南师范大学生命科学学院	6	15	2.0	3.0
3	李彦霞		3	27	2.0	3.0
4	王国强		10	46	3.0	6.0
5	昌静峰		4	6	2.0	2.0
6	徐桂超	河南师范大学生命科学学院	3	5	2.0	2.0
7	孙新城		4	12	2.0	3.0