腺相关病毒载体介导的人类HIF-1α基因对海马神经细胞凋亡的影响

• 作者: 单铁英 李玲 柴锡庆 苏安英
• 来源期刊: 职业与健康
• 学科: 医学
• 关键词: 缺氧诱导因子-1α 原代培养 海马 转染
• 年，卷（期）: 2010,（20）
• 页码范围: 2290-2294
• 分类号: R373.9
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人类缺氧诱导因子-1α(human hypoxia inducible factor,HIF-1α)的腺病毒相关载体(rAAV-HIF-1α),并观察其对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导原代培养海马神经细胞凋亡及细胞内游离钙离子浓度的影响.方法 构建含人类HIF-1α基因的AVV载体rAAV-HIF-1α转染BHK21细胞并选择培养获得的G418抗性细胞,即AVV载体细胞株.以重组单纯疱疹病毒感染此细胞株获得rAAV-HIF-1α,PCR技术鉴定病毒,地高辛标记的CMV探针点杂交方法测定重组病毒滴度电泳测定病毒纯度,SDS-PAGE电泳测定病毒纯度,Aβ25-35旅导原代培养海马神经细胞凋亡.Western印迹检测目的蛋白的表达.流式细胞术分析细胞凋亡百分率,激光共聚焦显微镜测定细胞内游离钙离子浓度.结果 PCR证实rAAV-HIF-1α内含有人HIF-1α基因序列,病毒滴度为1×1012/ml,纯度大于98%,感染原代培养海马神经细胞后能够表达目的蛋白,同时可显著降低Aβ25-35诱导海马神经细胞凋亡百分率及细胞内游离子浓度上调(P<0.05).结论 缺氧诱导因子-1α基因转染可能通过抑制细胞内游离钙离子浓度上调使海马神经细胞对Aβ25-35产生抗凋亡作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单铁英	河北工程大学医学院	86	411	11.0	16.0
2	苏安英	河北工程大学医学院	47	223	8.0	13.0
3	柴锡庆		33	228	8.0	14.0
4	李玲	河北工程大学医学院	35	92	6.0	8.0