拟南芥硫代葡糖苷酶基因TGG1的克隆、表达和酶学特性

• 作者: 孙雪飘 张家明 张盛敏
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 拟南芥 芥子酶 硫代葡糖苷 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2010,（21）
• 页码范围: 54-58
• 分类号: Q946
• 字数: 4086字
• 语种: 中文

摘要

采用RT-PCR方法克隆拟南芥硫代葡糖苷酶基因TGG1,利用毕氏酵母表达.重组蛋白用镍亲和柱纯化,获得高纯度芥子酶.重组蛋白分子量78kD,与天然TGG1分子量接近,为糖基化蛋白.TGG1信号肽在酵母中具有分泌功能,约25%芥子酶分泌到培养基中.TGG1重组蛋白具有广泛的pH适应性,最适反应温度40℃左右.其活性被低浓度Vc激活,被高浓度Vc抑制.用Hanes plot方法计算TGG1重组蛋白,以Sinigrin为底物时,Km为65 μmol/L,最大反应速率Vmax为3.28 μmol/(min·mg).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张家明	海南大学农学院	39	207	7.0	12.0
3	孙雪飘	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	18	123	6.0	10.0
4	张盛敏	海南大学农学院	2	4	1.0	2.0