蛋白酶体活性测定与组分分析方法的建立

• 作者: 潘小芬 谢军 陈晓勤
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白酶体 活性 组分 蛋白酶体抑制剂 蛋白酶体活性 检测方法
• 年，卷（期）: 2010,（50）
• 页码范围: 9374-9377
• 分类号: R318
• 字数: 5221字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.50.016

摘要

背景:26S蛋白酶体对维持细胞周期、增殖、生存等细胞生物学行为的正常具有极其重要的作用,但目前对细胞体内蛋白酶体活性的测定及组分分析缺少明确的方法.目的:建立蛋白酶体活性与组分的分析方法,用以检测肿瘤组织、细胞蛋白酶体的活性状态与组分表达情况.方法:应用3种特异性的荧光多肽底物Suc-LLVY-AMC、Z-ARR-AMC和Z-LLE-AMC建立对蛋白酶体的糜蛋白酶样、胰蛋白酶样和肽基谷氨酰肽水解酶样蛋白酶活性的测定方法.并基于蛋白酶体特异亲和性探针AdaK(Bio)Ahx3L3VS建立对蛋白酶体各亚基(包括β1/β1i,β2/β2i,β5/β5i)组分分析的方法.结果与结论:利用特异性的荧光多肽底物检测蛋白酶活性及蛋白酶体特异亲和性探针检测蛋白酶体亚基组分分析的方法发现在K562红白血病细胞,β2、β5亚基表达较高,而蛋白酶体抑制剂PS341及PSI对K562细胞的蛋白酶体活性与组分的抑制作用主要是靶定在β5和β5i亚基,抑制其糜蛋白酶样活性.实验建立了对以上3种蛋白酶体活性测定及组分分析的方法,为蛋白酶体抑制剂的体外活性鉴定提供了实验方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈晓勤	中山大学肿瘤防治中心血液肿瘤科	15	84	5.0	8.0
2	谢军	中国科学院广州生物医药与健康研究院	33	202	7.0	13.0
3	潘小芬	中国科学院广州生物医药与健康研究院	1	10	1.0	1.0