重组猪干扰素α的纯化工艺研究

• 作者: 吴琼 夏俊保 王明丽 苏世云 赵俊
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 重组蛋白 猪α干扰素 层析
• 年，卷（期）: 2010,（14）
• 所属期刊栏目: 动物与饲料科学
• 页码范围: 7363-7365
• 分类号: S855.3
• 字数: 2659字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2010.14.085

摘要

[目的]研究重组猪干扰素α的纯化工艺,为进一步研究该蛋白的分子结构及rPoIFN-α标准品的制备奠定基础.[方法]将含重组菌E.coli BL21诱导表达后得到的粗制rPoIFN-α,分别用2种方案进行纯化.方案1,依次用GST亲和层析法、DEAE阴离子交换法及分子筛法层析三步法进行纯化;方案2,依次用GST亲和层析和分子筛法层析两步法进行纯化.纯化结果用SDS-PAGE及Western-blot进行纯度检测及鉴定.[结果]诱导表达后的表达产物经SDS-PAGE检测,发现在45 Kd分子量处有目的条带,Western-blot检测有特异性条带.通过两步法纯化后的rPoIFN-α纯度达96%,蛋白得率为42.8%,三步纯化纯度为98.8%.[结论]两步法得到的蛋白纯度非常接近三步法,但与三步法相比工艺更为简单方便.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴琼		10	30	3.0	5.0
2	赵俊		37	143	7.0	9.0
3	王明丽		174	907	13.0	19.0
4	夏俊保		3	26	3.0	3.0
5	苏世云		2	12	2.0	2.0