南方红豆杉紫杉二烯合成酶cDNA的克隆

• 作者: 王刚 肖颖
• 来源期刊: 现代中西医结合杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 南方红豆杉 紫杉醇 紫杉二烯合成酶 cDNA克隆
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 529-531,602
• 页数: 4页
• 分类号: R914.5
• 字数: 3010字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-8849.2010.05.004

摘要

目的 采取分子手段通过紫杉醇生物合成途径对细胞中的紫杉醇产量进行调控.方法 根据已发表的中国红豆杉紫杉二烯合成酶cDNA序列设计2对引物,从南方红豆杉愈伤组织提取总RNA,通过RT-PCR技术扩增出该酶5'端长度为1201bp和3'端长度为1388bp的2个cDNA片段,将其克隆到pGEM-T Vector上并转化到E. coli DH5α中,5'端片段经XbaⅠ和BglⅡ双酶切鉴定,3'端片段经BglⅡ和SacⅠ双酶切鉴定后,对阳性克隆进行序列测定,证实确为紫杉二烯合成酶基因.将这2个cDNA片段与双元载体pCAMBIA1300连接并转化到E. coli DH5α中,经XbaⅠ和SacⅠ双酶切鉴定.结果 成功得到全长为2589bp的紫杉二烯合成酶基因,编码862个aa.结论 南方红豆杉紫杉二烯合成酶基因与中国红豆杉紫杉二烯合成酶基因具有98%的同源性;并且紫杉二烯合成酶cDNA成功插入到pCAMBIA1300中,为下一步的转基因工作做好了准备.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖颖	石家庄学院化工学院	29	277	11.0	15.0
2	王刚	河北师范大学生命科学学院	31	488	12.0	21.0