金堂黑山羊FSHR启动子克隆及转录活性分析

• 作者: 曹冶 李键 梁天宇
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 金堂黑山羊 FSHR启动子 表达载体 环磷酸腺苷
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 所属期刊栏目: 动物与饲料科学
• 页码范围: 4610-4613
• 页数: 4页
• 分类号: S827
• 字数: 3061字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2010.09.077

摘要

[目的]分析金堂黑山羊FSHR启动子的克隆和转录活性,为分子水平研究金堂黑山羊FSHR的可变剪接提供基础.[方法] 从金堂黑山羊子宫中提取总的DNA, 设计1对引物用于扩增FSHR启动子片段,并进行测序和同源性分析.将克隆得到的FSHR启动子片段替换CMV启动子构建pcFSHRB2表达载体,分别将pcFSHRB1和pcFSHRB2表达载体转染到HEK293细胞中,用2 mIU/ml FSH处理细胞,在处理后24、48 h分别检测环磷酸腺苷(cAMP)的产量,用以分析FSHR的转录活性.[结果]克隆得到的FSHR启动子序列与鸡和家鼠的同源性分别为34.2%和41.6%,推测其转录起始位点为-576 bp处,其上游含有2 个TATA-box、4个CAAT-box、1 个E-box和1个W1-box.所构建的pcFSHRB2和pcFSHRB1表达载体转染细胞后用FSH处理24和48 h时产生的cAMP的量分别为299.581 3、125.528 1 pmol/L和120.057 1、109.940 7 pmol/L.[结论]金堂黑山羊的FSHR启动子是一个典型的Ⅱ型真核启动子,是一个强启动子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李键	西南民族大学生命科学与技术学院	117	464	10.0	15.0
2	曹冶		30	77	4.0	6.0
3	梁天宇	西南民族大学生命科学与技术学院	8	19	3.0	3.0