毛竹不同截短U3启动子的克隆及表达分析

• 作者: 凡惠金 金康鸣 卓仁英 乔桂荣
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 基因组编辑 LUC活性 PeU3启动子 毛竹
• 年，卷（期）: null,（null）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 299-307
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11983/CBB19217

摘要

具有明确转录起始位点的U3和U6启动子是CRISPR/Cas9技术中驱动sgRNA转录的重要元件。从毛竹(Phyllostachys edulis)中克隆了2个PeU3启动子，均进行了3个不同长度的截短，长度分别为550、397和149 bp及561、392和152 bp；并分别构建6个启动子驱动的GUS及LUC植物表达载体，再利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法分别转化麻竹(Dendrocalamus latiflorus)愈伤组织和烟草(Nicotiana benthamiana)叶片。结果显示，这些PeU3启动子总体都具有转录活性，不同PeU3启动子以及同一PeU3启动子不同截短时其转录活性不同，其中长度为397 bp的PeU3-1-2pro启动子活性最强，可为构建竹子CRISPR/Cas9基因组编辑体系提供更多理想的内源启动子。