番茄不同截短U3启动子的克隆及功能分析

• 作者: 刘晓东 刘超 蒲艳 阿尔祖古丽·塔什 魏倩
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 番茄 SlU3启动子 克隆 农杆菌转化 番茄叶片
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·生物技术
• 页码范围: 33-39
• 页数: 7页
• 分类号: Q75
• 字数: 5936字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.201750912

摘要

从中蔬四号番茄品种中克隆能在番茄叶片中高效转录的SlU3启动子,为今后利用CRISPR/Cas9基因编辑技术进行分子育种奠定了基础.采用2轮PCR的方法,第1轮PCR从中蔬四号番茄品种中克隆了3种SlU3启动子,再采用Transfer PCR方法分别对3个启动子进行截短,共得到6个不同长度的启动子,并分别构建6个截短的SlU3启动子驱动GUS融合植物表达载体,利用农杆菌转化法分别转染番茄叶片.运用DNAMAN软件对已克隆的SlU3和拟南芥AtU3启动子序列具有转录功能的必要元件进行序列分析;经过2轮PCR,首先从中蔬四号番茄品种中克隆了3种SlU3-1P、SlU3-3P、SlU3-4P启动子,其长度分别是1156,1114,1147 bp,再采用Transfer PCR方法分别对3个启动子进行截短,共得到6个不同长度的启动子,其长度依次是489,318,450,248,457,248 bp,并分别构建6个截短SlU3启动子驱动GUS融合植物表达载体,启动子序列比对分析发现,番茄U3启动子与拟南芥U3启动子一样,也含有比较保守的2个元件,USE和TATA框,2个元件之间的位置比较固定.利用农杆菌转化法分别转染番茄叶片,结果显示,成功侵染后的番茄叶片均被染成蓝色,表明已克隆的6种不同截短番茄SlU3启动子均具有转录活性.成功克隆了6种在番茄叶片中高效转录的SlU3启动子,为构建番茄CRISPR/Cas9基因编辑载体提供更多高效的内源启动子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘超	新疆农业大学农学院新疆农业大学农业生物技术重点实验室	38	91	5.0	7.0
2	刘晓东	新疆农业大学农学院新疆农业大学农业生物技术重点实验室	18	42	4.0	6.0
3	蒲艳	新疆农业大学农学院新疆农业大学农业生物技术重点实验室	2	4	1.0	2.0
4	阿尔祖古丽·塔什	新疆农业大学农学院新疆农业大学农业生物技术重点实验室	1	3	1.0	1.0
5	魏倩	新疆农业大学农学院新疆农业大学农业生物技术重点实验室	1	3	1.0	1.0