5-吲哚甲基海因及其工程菌转化产物的高效液相色谱分析

• 作者: 严明 许琳 钱凯
• 来源期刊: 现代农业科技
• 学科: 化学
• 关键词: 高效液相色谱 5-吲哚甲基海因 D-氨甲酰-N-色氨酸 D-色氨酸
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 所属期刊栏目: 农业基础科学
• 页码范围: 17-19
• 分类号: O657.7
• 字数: 3926字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5739.2010.07.003

摘要

通过RP-HPLC同时检测酶水解反应前后底物5-吲哚甲基海因及产物D-氨甲酰-N-色氨酸的含量变化,不仅可以检测海因酶的活性,还能分析酶反应过程的转化效率.采用Merck公司的Purospher STAR RP-C18e色谱柱(4.6 mm×250.0 mm,5μm),以乙腈-20mmoL/L磷酸二氢钾缓冲液(体积比25:75)为流动相,磷酸调pH值为3.0,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为220 nm,于10 min内很好地实现了各组分的分离.采用外标法进行定量分析,D-色氨酸、5-吲哚甲基海因和D-氨甲酰-N-色氨酸的线性范围分别是0.10～1.00mg/mL(r=0.999 1)、0.20～2.00mg/mL(r=0.9989)、0.20-2.00mg/mL(r=0.998 9);酶反应体系中5-吲哚甲基海因和D-氨甲酰-N-色氨酸的加标回收率分别为99.3%～100.2%和98.0%～99.3%,精密度分别为0.51%～0.87%和0.43%～0.94%.试验结果表明该法快速简便、准确可靠.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严明	南京工业大学制药与生命科学学院	56	226	9.0	11.0
2	许琳	南京工业大学制药与生命科学学院	60	216	8.0	10.0
3	钱凯	南京工业大学制药与生命科学学院	4	6	2.0	2.0