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SHH-N基因腺相关病毒表达载体的构建及其对神经干细胞增殖相关基因的影响
SHH-N基因腺相关病毒表达载体的构建及其对神经干细胞增殖相关基因的影响
作者:
刘东升
崔岩
张波
李桂林
杜延平
王任直
王岩
申仑
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
神经干细胞
SHH信号通路
Nmyc基因
摘要:
目的 构建rAAV-SHH-N-EGFP载体并检测其对神经干细胞增殖相关基因影响.方法 分离并培养大鼠脑室下区神经干细胞,提取RNA、反转录、PCR得到SHH-N的cDNA,克隆入pSNAV2.0-CMV-IRES-EGFP,包装得到腺相关病毒rAAV-SHH-N-EGFP,感染神经干细胞48 h后,采用实时定量PCR检测SHH信号通路下游相关基因的mRNA水平变化,并观察rAAV-SHH-N-EGFP载体在神经干细胞内的表达情况.结果 (1)克隆得到SHH-N基因,测序结果与NCBI报道序列一致.(2)成功构建pSNAV2.0-CMV-SHH-N-EGFP表达载体并鉴定,包装得到rAAV-SHH-N-EGFP.(3)实时定量PCR分析rAAV-SHH-N-EGFP感染神经干细胞48 h后,rAAV-SHH-N-EGFP处理组较感染rAAV-EGFP的对照组,Glil和Nmyc的mRNA水平上调.(4)rAAV-SHH-N-EGFP可有效感染神经干细胞,在感染14 d后稳定表达SHH-N.结论 成功构建rAAV-SHH-N-EGFP过表达载体并使其在神经干细胞内稳定表达.过表达SHH-N可使神经干细胞内SHH信号通路相关基因Glil转录水平上调,并使细胞增殖相关基因Nmyc转录水平上调.
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文献信息
篇名
SHH-N基因腺相关病毒表达载体的构建及其对神经干细胞增殖相关基因的影响
来源期刊
基础医学与临床
学科
医学
关键词
神经干细胞
SHH信号通路
Nmyc基因
年,卷(期)
2011,(3)
所属期刊栏目
研究论文
研究方向
页码范围
291-296
页数
分类号
R394.3
字数
3743字
语种
中文
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SHH信号通路
Nmyc基因
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
基础医学与临床
主办单位:
北京生理科学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1001-6325
CN:
11-2652/R
开本:
大16开
出版地:
北京东单三条5号
邮发代号:
82-358
创刊时间:
1981
语种:
chi
出版文献量(篇)
7613
总下载数(次)
10
总被引数(次)
29500
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