水通道蛋白4示踪系统的构建及评价

• 作者: 姜久昆 潘建 祝建勇 袁志华 陆远强
• 来源期刊: 中华危重症医学杂志（电子版）
• 学科: 医学
• 关键词: 绿色荧光蛋白质类 水通道蛋白质4 通透性 转染 星形细胞
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-8
• 分类号: R741
• 字数: 3427字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-6880.2011.05.002

摘要

目的 构建绿色荧光蛋白(GFP)标识的水通道蛋白4(AQP4)示踪系统,建立表达AQP4的大鼠星形胶质细胞水通透性的评价系统. 方法 利用基因重组技术,构建pEGFP-C1 -AQP4-M23表达质粒,并转染CTX-TNA2星形胶质细胞,利用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)成像技术分析GFP标记的AQP4-M23在细胞上的分布,动态观察钙黄绿素荧光强度随时间的变化,评价AQP4-M23对细胞膜水通透性的影响.结果 正确获取AQP4-M23全长序列,利用基因重组技术连接pEGFP-C1质粒和AQP4-M23序列,酶切证实成功构建pEGFP-C1-AQP4-M23质粒.LSCM扫描显示GFP标记的AQP4-M23融合蛋白在细胞膜上均匀分布表达,胞浆内仅痕量表达；表达AQP4-M23的CTX-TNA2细胞对水的通透性明显增加(P＜0.01). 结论 成功构建了GFP标识的AQP4示踪系统,建立了表达AQP4的大鼠星形胶质细胞水通透性的评价系统,AQP4可使星形胶质细胞对水的通透性明显增加.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜久昆	浙江大学医学院附属第一医院急诊科	12	25	3.0	4.0
2	陆远强	浙江大学医学院附属第一医院急诊科	52	264	8.0	13.0
3	潘建	浙江大学医学院附属第一医院急诊科	9	51	4.0	7.0
4	袁志华	安徽省立医院老年医学科	2	9	2.0	2.0
5	祝建勇	浙江大学医学院附属第一医院急诊科	5	16	2.0	4.0