琥珀酰辅酶A转移酶硝基化酪氨酸位点特异单克隆抗体的制备

• 作者: 何靖玄 张学文 黄丽华 黄妤
• 来源期刊: 湖南农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 线粒体琥珀酰辅酶A转移酶 硝基化酪氨酸 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产
• 页码范围: 436-439
• 分类号: R392.11
• 字数: 3427字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1238.2011.00436

摘要

线粒体琥珀酰辅酶A转移酶(SCOT)含有4个酪氨酸残基,其4、76位点酪氨酸(Tyr4、Tyr76)的硝基化可导致其酶活性下降,制备特定的抗体可对其硝基化水平和位点进行检测.应用淋巴细胞杂交瘤技术,以化学合成的含琥珀酰辅酶A转移酶硝基化Tyr4和Tyr76肽段为半抗原,偶联钥孔血蓝蛋白(KLH)后,作为免疫原免疫Balb/c小鼠,分离免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了多株融合细胞.经对融合细胞多次筛选和检测,最终获得4株单克隆抗体,分别对应SCOT Tyr4和Tyr76硝基化后表位,其间接ELISA检测效价分别达到1∶128 000、1∶32000、1∶512000和1∶4096000,表明抗体具有较强特异性和灵敏度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学文	湖南农业大学生物科学技术学院	120	939	18.0	24.0
2	黄妤	湖南农业大学生物科学技术学院	17	44	3.0	6.0
3	黄丽华	湖南农业大学生物科学技术学院	43	339	9.0	17.0
4	何靖玄	湖南农业大学生物科学技术学院	1	0	0.0	0.0