神经细胞的原代培养及缺血再灌注模型的建立

• 作者: 容琼文 张士良 苏庆杰
• 来源期刊: 海南医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 神经细胞 缺血再灌注模型 原代培养 硅石胶态悬浮液 密度梯度离心法 免疫细胞化学
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 31-34
• 页数: 4页
• 分类号: R-33
• 语种: 中文
• DOI: CNKI:46-1049/R.20110107.1405.013

摘要

目的:建立良好的SD乳鼠神经细胞原代培养及缺血再灌注模型.方法:选用SD乳鼠大脑皮质进行细胞培养.采用机械研磨、过滤、胰酶消化、pereoll(硅石胶态悬浮液)、密度梯度离心法分离纯化大脑皮质细胞后,选择含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基进行原代培养.利用分离纯化的幼鼠大脑皮质.制作细胞爬片,利用免疫组化进行鉴定.结果:大脑皮质细胞贴壁生长,4～7 d基本达到融合,结合形态学及免疫细胞化学鉴定,原代细胞培养97%为神经细胞.而后采用国际上公认的氧糖剥夺发制作缺血再灌注模型.结论:采用机械研磨、过滤、胰酶消化结合percoll:密度梯度离心法分离培养的大脑皮层神经细胞数量多,均一性生长佳,采用国际上公认的氧糖剥夺发制作缺血再灌注模型.为以后实验打下基础.