神经生长因子基因的克隆及在昆虫细胞中的表达

• 作者: 何冰 俞新大 江汉民 程秀玮 赵娟
• 来源期刊: 南开大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 神经生长因子 杆状病毒 昆虫细胞 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

以人胎盘组织DNA为模板,经PCR扩增出包含信号肽,前肽和成熟肽部分的prepro-NGF序列,经序列分析后克隆至转移载体pFastBac1中得到pFastBac-NGF,再将其转化含穿梭载体Bacmid的大肠杆菌DH10Bac,发生转座作用后,得到含NGF基因的重组穿梭载体rBacmid-NGF,用纯化的rBacmid-NGF DNA直接转染培养的昆虫细胞Sf9,得到重组病毒rAcV-Bac-hGH,经PCR和酶切鉴定,NGF基因正确地插入在病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下.表达产物经SDS-PAGE和Western blot检测在34 kD左右有一表达带并具有神经生长因子的免疫学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江汉民		5	14	2.0	3.0
2	何冰		8	14	2.0	3.0
3	赵娟		7	84	3.0	7.0
4	俞新大		10	59	4.0	7.0
5	程秀玮		2	8	1.0	2.0