棉花种子特异性启动子的克隆及表达载体构建

• 作者: 宋国立 王巧莲 琦明玉 邹长松 陆才瑞
• 来源期刊: 棉花学报
• 学科: 农学
• 关键词: Lea蛋白:D113基因启动子 D34基因启动子 启动子分析 表达载体
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究与进展
• 页码范围: 427-432
• 分类号: S562.035.3
• 字数: 3251字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-7807.2011.05.007

摘要

种子特异性表达启动子是植物种子基因工程改良的重要工具.Lea(Late embryogenesis abundant)蛋白是胚胎发育后期种子中大量积累的一系列蛋白质,因此,其调控序列可能提供一个很好来源的种子特异性表达启动子.为研究植物Lea蛋白基因启动子在种子中的特异性表达,本研究通过PCR扩增,从亚洲棉(Gossypium arboreum L.)石系亚1号中克隆了Lea蛋白基因家族中D113基因上游1262 bp的调控序列和D34基因上游1445 bp的调控序列.DNA序列分析结果表明,克隆到的两个片段与已报道的Lea蛋白基因同一家族该基因的对应序列的相似性分别达到97.43％和94.27％.分别用限制性内切酶HindⅢ和xbaI双酶切重组质粒pGEMT-D和改造后的表达载体pBI121-T,分别回收pGEMT-D重组质粒中的小片段和pBI121-T植物表达载体中的大片段,经连接、转化和鉴定,获得由D113基因启动子和D34基因启动子驱动报告基因GUS的新型植物表达载体pBI121-D113、pBI1 21-D34,为外源基因在棉花种子中的定位表达研究奠定基础.