长柄链格孢AlCyP1基因的克隆及其在渗透胁迫适应中的作用

• 作者: 张克勤 杨金奎 毕薇 祝明亮 罗义勇 路则宝
• 来源期刊: 浙江大学学报(农业与生命科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 长柄链格孢 基因差异表达 亲环蛋白AlCyP1 渗透胁迫 二甲酰亚胺类杀菌剂
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 生物科学与技术
• 页码范围: 133-141
• 分类号: Q939.95
• 字数: 5773字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9209.2011.02.003

摘要

为了阐明烟草赤星病(tobacco brown-spot disease)病原真菌长柄链格孢(Alternaria longipes)对二甲酰亚胺类杀菌剂抗性的分子机制,以不同抗性水平的长柄链格孢菌株为实验材料,通过基因钓鱼(Gene Fishing)技术进行基因差异表达分析;并利用基因敲除技术对已克隆到的AlCyP1基因进行功能分析.结果表明:一个亲环蛋白基因AlCyP1的表达量在不同抗性水平的长柄链格孢中存在明显差异;应用DNA步移(DNA walking)方法克隆得到AlCyP1基因的DNA序列,其开放阅读框中存在2个翻译起始密码子,可以编码产生2种不同长度的多肽,长、短多肽产物分别具有222和188个氨基酸,其中短多肽起始于长多肽的第35个密码子;另外,氨基酸序列同源性分析发现,AlCyP1和其他真菌的亲环蛋白具有很高的同源性,达50.0%～61.3%;利用基因敲除技术对AlCyP1基因进行功能分析发现,该基因通过表达水平的改变参与了长柄链格孢对渗透胁迫的适应调节过程.