人伤寒沙门菌Ty21a菌蜕的制备

• 作者: 于虹 俞建萍 吕兴茹 周育森 寇志华 温晶 王欣 赵光宇 郭彦
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: Ty21a菌 细菌菌蜕 电击转化 噬菌体PhiX174 E基因
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 479-483
• 分类号: R378.2
• 字数: 3662字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.06.004

摘要

目的 探讨利用噬菌体PhiX174 E基因制备人伤寒沙门菌Ty21a菌蜕的可行性以及适当制备条件.方法 将PhiX174 E基因克隆至温控表达系统,筛选获得裂解效率较高的质粒pMBE,通过优化转化方法 将pMBE导入Ty21a,利用温控表达系统进行Ty21a菌蜕制备.菌落计数计算菌蜕裂解效率,并通过扫描电镜和透射电镜观察其形态结构.结果 裂解质粒pMBE介导大肠杆菌DH5α的裂解效率达99.99%;通过电击转化方法 获得重组Ty21a(pMBE),利用温控表达系统成功制备Ty21a菌蜕,裂解效率达96.77%.电镜观察菌蜕结构完整并呈空泡状结构,并能看到溶菌孔道.结论 PhiX174 E基因表达可实现人伤寒沙门菌Ty21a裂解形成Ty21a菌蜕,为其作为疫苗和药物递送载体的研究奠定了基础.