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摘要:
从人胚肺成纤维细胞中提取总RNA,利用RT-PCR法获得人角质细胞生长因子-2(hKGF-2)cDNA,并通过PCR方法扩增,再与原核表达载体pET3c连接后转化至BL21(DE3)宿主细胞中获得表达菌株.通过流加补料方式和发酵条件的控制,进行高密度培养,并通过IPTG诱导获得可溶性表达的目的产物.结果表明:目的蛋白占菌体总蛋白的30.0%以上; 经阳离子交换层析、肝素亲和层析两步柱层析方法获得的rhKGF-2纯度高于99.0%.建立了利用转受体FGFR2-Ⅲb的BaF3细胞株进行rhKGF-2促增殖作用的活性测定方法,活性测定结果呈典型的S型曲线,并在一定范围内具有剂量依赖性.
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文献信息
篇名 重组人角质细胞生长因子-2基因的克隆、表达及活性
来源期刊 吉林大学学报(理学版) 学科 生物学
关键词 重组角质细胞生长因子-2(rhKGF-2) 高密度培养 柱层析 转受体FGFR2-Ⅲb BaF3细胞株 生物活性
年,卷(期) 2011,(6) 所属期刊栏目 生命科学
研究方向 页码范围 1150-1156
页数 分类号 Q78
字数 3239字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王晓杰 温州医学院药学院 4 31 1.0 4.0
2 李校堃 吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心 56 341 11.0 16.0
3 官丽莉 吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心 13 11 2.0 3.0
4 王艳芳 吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心 22 237 7.0 15.0
5 田海山 吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心 5 7 1.0 2.0
9 唐禄 温州医学院药学院 1 1 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
重组角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)
高密度培养
柱层析
转受体FGFR2-Ⅲb
BaF3细胞株
生物活性
研究起点
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期刊影响力
吉林大学学报(理学版)
双月刊
1671-5489
22-1340/O
大16开
长春市南湖大路5372号
12-19
1955
chi
出版文献量(篇)
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