聚酰胺-胺型树状聚合物介导基因转染的实验研究

• 作者: 王丹茹 王雪
• 来源期刊: 组织工程与重建外科杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 聚酰胺-胺型树状聚合物 成纤维细胞 转染 基因治疗
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 244-247,253
• 分类号: Q786
• 字数: 4188字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2011.05.002

摘要

目的 探讨聚酰胺-胺型树状聚合物(PAMAM)作为基因载体,体外转染成纤维细胞的可行性.方法 ①将pEGFP与PAMAM按不同电荷比混合,通过原子力显微镜(AFM)对PAMAM和PAMAM-pEGFP复合物进行粒径、形态的表征；凝胶电泳实验和Zeta电位实验检验PAMAM与pEGFP质粒在不同电荷比时形成复合物的能力;通过DNA共沉淀试验检测不同电荷比下PAMAM对质粒pEGFP的包封率.②将不同电荷比的PAMAM-pEGFP复合物转染至小鼠胚胎成纤维细胞系,48 h后荧光显微镜下观察转染情况.③CCK-8实验检测转染后细胞的增殖活性.结果 PAMAMpDNA复合物的粒径约10 nm.PAMAM在电荷比大于2时就能有效包裹质粒.随电荷比的增加,复合物的Zeta电位增加,在溶液中的稳定性和分散性也提高.包封率在电荷比为4∶1时达95％.转染效率随电荷比的增加呈增高趋势,其中在4∶1和6∶1时转染效率达到最高.细胞毒性与电荷比有关,电荷比大于6∶1时,PAMAM对细胞生长有毒性作用.结论 PAMAM纳米载体可安全有效地介导基因转染,是一种理想的基因递送系统.