核盘菌诱导下甘蓝型油菜宁RS-1的SSH文库构建

• 作者: 周晓婴 戚存扣 陈松
• 来源期刊: 中国油料作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甘蓝型油菜 核盘菌 抑制消减杂交 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 土肥植保
• 页码范围: 157-161
• 分类号: S435.654
• 字数: 3996字
• 语种: 中文

摘要

以甘蓝型油菜宁RS-1为材料,用核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary)对幼苗进行接种,提取经核盘菌诱导前和诱导后的宁RS-1叶片mRNA,经反转录成cDNA,以及经过酶解后加接头和两次杂交,构建差异表达的抑制消减(SSH)cDNA文库.正向消减文库是以诱导后的宁RS-1 cDNA为tester,以正常的宁RS-1 cDNA为driver.所构建的正向文库重组率达到96.2%,反向文库重组率达到94.5%,文库容量均达到了2 190和2 780,表明所构建的文库质量良好.对从文库中随机挑取的克隆进行测序分析,获得了与抗病和代谢有关的基因,如γ-谷氨酰半胱氨酸酶基因、抗真菌蛋白基因、铁蛋白基因、ACC氧化酶基因等,为开展油菜抗菌核病重要功能基因的克隆和鉴定奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	戚存扣	江苏省农业科学院经济作物研究所	97	1515	22.0	33.0
2	陈松	江苏省农业科学院经济作物研究所	50	525	13.0	20.0
3	周晓婴	江苏省农业科学院经济作物研究所	3	10	2.0	3.0