重组PACAP衍生物RMBYLL的高效制备及其体外生物学效应

• 作者: 叶祖禄 徐文娜 罗天杰 马义
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因重组 垂体腺苷酸激活肽衍生物 血管活性肠肽/垂体腺苷酸环化酶活化肽受体2 生物学效应
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 387-391
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

为了利用基因工程技术高效制备具有治疗Ⅱ型糖尿病功能的垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)衍生物RMBYLL,并在体外研究其生物学效应,采用基因重组技术表达重组肽RMBYLL,纯化、制备并鉴定重组肽RMBYLL后,利用特定细胞系和Western-blot等技术,检测RMBYLL对VPAC1、VPAC2和PAC1受体的选择性和激动活性,以及重组肽RMBYLL对胰岛素受体介导的信号传导最终效应物-葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的影响.实验结果表明:利用重组肽技术制备的RMBYLL的Mr为3.901k,纯度大于95％,其产率为18.7 mg/(L发酵产物)；制备的RMBYLL可与VPAC2受体特异结合并显著促进VPAC2-CHO细胞cAMP的产生,其受体半激活浓度(EC50)为0.90 nmol/L,目的肽RMBYLL可显著增强3T3-L1脂肪细胞GLUT4的表达,阳性实验组是对照组的1.91倍.由此表明,利用本研究确立的表达、纯化策略可实现高活性RMBYLL的高效制备,应用前期构建的含有特定受体的CHO细胞和3T3-L1脂肪细胞模型,可方便有效地进行相关药物肽的体外生物学效应研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马义		38	182	8.0	11.0
2	罗天杰		4	0	0.0	0.0
3	叶祖禄		3	0	0.0	0.0
4	徐文娜		3	0	0.0	0.0