对虾白斑综合症病毒变性高效液相色谱检测方法的建立与应用

• 作者: 何俊强 刘荭 史秀杰 岳志芹 杨大伟 梁成珠 赵巍 赵玉然 马亚
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 变性高效液相色谱 对虾 白斑综合症病毒 检测
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 47-50
• 分类号: S945.19|S945.4
• 字数: 2572字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2011.05.018

摘要

据对虾白斑综合症病毒(WSSV)的基因保守序列,使用Primer Explorer V3软件设计了2条引物,利用PCR的扩增产物,结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术,建立了一种对虾白斑综合症病毒的DHPLC快速检测方法.该检测方法特异性好,与传染性皮下和造血器官坏死病毒、斑节对虾杆状病毒、肝胰腺细小病毒、对虾杆状病毒以及对虾基因组DNA无交叉反应;检测灵敏度较高,约为10-5ng/pL,高于常规PCR及荧光定量PCR的灵敏度.用建立的DHPLC方法对100尾对虾样品进行了临床检测,结果与荧光定量PCR检测结果一致.WSSV的DHPLC检测方法,特异性强、灵敏度高,是对WSSV进行有效检测的一种新方法.