乙型肝炎病毒X蛋白稳定表达株的构建及沉默效果观察

• 作者: 周倩云 张莉萍 文阳安 杨兵 陈维贤 黄世峰
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒X蛋白 肝癌 小分子干扰RNA 稳定表达
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 377-382
• 分类号: R-331
• 字数: 3449字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)基因的HepG2-HBX细胞系,观察小分子干扰RNA(siRNA)对HBX基因的特异性抑制效果.方法 用脂质体将含有HBX序列的真核表达质粒pCDNA3.1(+)/HBX-Flag转染人HepG2细胞系,通过G418筛选后,分别经RT-PCR和免疫组化对HBX的表达进行验证;化学合成靶向HBX的siRNA(即siHBX),转染入HBX稳定表达株,分别以RT-PCB和实时荧光定量RT-PCR检测HBX mRNA表达水平,Western blot检测HBX蛋白表达水平以验证siHBX对HBX基因的沉默效应,流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 成功构建表达HBX基因的HepG2-HBX细胞系;siHBX可以高效特异抑制HBX表达,并抑制细胞周期进展.结论 siHBX可作为一种靶向抑制肝癌细胞系内HBX表达的策略,为后续HBV感染相关性肝癌的治疗奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈维贤	重庆医科大学附属第二医院检验科	74	348	11.0	15.0
2	黄世峰	重庆医科大学附属第一医院检验科	20	70	5.0	7.0
3	张莉萍	重庆医科大学附属第一医院检验科	158	1339	18.0	27.0
4	文阳安	重庆医科大学附属第一医院检验科	20	63	5.0	6.0
5	杨兵	重庆医科大学附属第一医院检验科	3	1	1.0	1.0
6	周倩云	重庆医科大学附属第一医院检验科	4	6	1.0	2.0