丙型肝炎病毒高变区1中介导感染的关键氨基酸残基鉴定

• 作者: 关默 刘小青 刘文字 劳文光 戚中田 王岩 解冰 赵平 陶清源
• 来源期刊: 微生物与感染
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 高变区1 侵入细胞 关键氨基酸残基
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 225-230
• 分类号: R373
• 字数: 3248字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6184.2011.04.005

摘要

丙型肝炎病毒( HCV)包膜E2蛋白氨基端的高变区1(HVR1)由27个氨基酸组成,是HCV蛋白中变异频率最高的肽段.HVR1含中和抗体表位,同时对HCV细胞侵入起重要作用,其结构与功能的关系目前尚不清楚.本研究对H77株包膜蛋白基因中的HVR1进行了一系列缺失突变,然后将突变体表达质粒与假病毒包装质粒共转染人胚肾(HEK)293T细胞,用蛋白免疫印迹法检测细胞中HCV包膜E2蛋白的表达,用荧光定量聚合酶链反应检测培养上清液中的HCV假病毒(HCVpp)含量,以人肝癌细胞Huh7.5为靶细胞检测HCVpp的感染力.结果显示,缺失整个HVR1或HVR1中部分氨基酸残基对HCV包膜蛋白表达及HCVpp产量均无明显影响,但对HCVpp感染力产生不同影响.缺失第16～24位氨基酸残基导致HCVpp感染力增强,缺失第1～8位或1～12位氨基酸残基仅部分降低HCVpp感染力,缺失第13～15位和25～27位中的任意一个氨基酸残基均导致HCVpp感染力低于原型的5％.结果提示,HVR1中第13～15位和25～27位的6个氨基酸是介导HCV感染的关键氨基酸残基.