基于Cre/Loxp系统Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶转基因小鼠的建立

• 作者: 卢清君 卢清显 张淑静 江其辉 王宁利 陈振文
• 来源期刊: 实验动物科学
• 学科: 生物学
• 关键词: Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶 loxp位点 X-gal染色
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究·论著
• 页码范围: 1-6,后插1-后插2
• 分类号: Q343.1
• 字数: 4840字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6179.2011.02.001

摘要

目的 采用大肠杆菌β-半乳糖酶基因LacZ作为报告基因,建立Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶含有loxp位点的转基因小鼠.与不同组织特异性Cre小鼠杂交,获得时空性表达Tyro3、Axl的转基因小鼠,为研究其在各个组织中的功能奠定基础.方法 构建含有loxp位点的Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶质粒,测序正确后,通过显微注射法将插入CAG启动子下游的Geo-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyro3基因的转基因载体注射人BDF1供体鼠受精卵,移植受精卵至ICR受体鼠,待产仔后,通过双引物PCR鉴定F0以及Fn代小鼠的基因型,RT-PCR,X-gal染色观察小鼠组织中LacZ基因,运用WB(Western Blot)检测转基因小鼠和野生型小鼠体内目的蛋白表达的差异.结果 获得了含有目的基因的转基因阳性小鼠;通过RT-PCR对阳性小鼠证明LacZ基因的存在;对存在LacZ基因的小鼠进行Xgal染色,在Geo-STOP-msTyro3的脑、睾丸、胸腺中观察到蓝色沉淀,在Geo-STOP-msAxl的脑、心、肾中观察到蓝色沉淀,间接说明目的基因能表达的组织和器官;对双阳性的Geo-STOP-msTyro3、Geo-STOP-msAxl转基因小鼠和野生型小鼠.WB检验证实Tyro3、Axl基因的表达没有差异,说明在加入stop序列之后,Tyro3基因确实存在,而且表达受到抑制.结论 成功建立Geo-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyr03酪氨酸受体转基因小鼠.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢清君		16	33	4.0	5.0
2	王宁利		186	741	14.0	20.0
3	江其辉	军事医学科学院实验动物中心	12	93	6.0	9.0
4	陈振文	首都医科大学基础医学院实验动物学系	78	366	11.0	15.0
5	卢清显	首都医科大学基础医学院实验动物学系	2	8	1.0	2.0
6	张淑静	首都医科大学基础医学院实验动物学系	1	0	0.0	0.0