日本三角涡虫热休克蛋白70(DjHSP70)C-端多肽表达及其抗血清制备

• 作者: 刘德增 娄昊 陈广文 马克学
• 来源期刊: 动物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 涡虫 HSP70 原核表达 蛋白纯化 抗血清
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础资料
• 页码范围: 72-77
• 分类号: Q812
• 语种: 中文

摘要

首先运用在线生物学软件对日本三角涡虫(Degusia japonica)热休克蛋白70(DjHSP70)氨基酸序列进行亲水区分析,发现该蛋白C-端含有较多亲水性氨基酸,然后以该段多肽序列为基础构建原核表达载体.采用PCR方法扩增450 bp cDNA片段,编码DjHSP70 C-端150个氨基酸多肽.将双酶切的cDNA片段与pET-28a载体连接后导入BL21受体菌,在IPTG诱导下表达出21 ku融合蛋白,分子量与预期相符.该融合蛋白采用Ni2+ -NTA agarose树脂进行纯化,纯化结果电泳检测后经灰度扫描分析显示纯度在95%以上.融合蛋白免疫新西兰大白兔获得高效价的抗血清,Western blot检测显示该抗血清不仅具有很强的特异性,而且还识别小鼠HSP70.此项工作为进一步研究淡水涡虫抗逆性奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马克学	河南师范大学生命科学学院	30	147	8.0	11.0
2	陈广文	河南师范大学生命科学学院	76	305	10.0	14.0
3	娄昊	河南师范大学生命科学学院	5	4	1.0	2.0
4	刘德增	河南师范大学生命科学学院	27	93	5.0	8.0