三角帆蚌热休克蛋白70基因克隆及其表达分析

• 作者: 付建平 刘毅 吴圣楠 李海军 隗黎丽
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 三角帆蚌 热休克蛋白70 序列分析 基因表达 水温刺激
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 页码范围: 50-55
• 页数: 6页
• 分类号: Q344+.1|S917
• 字数: 4919字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2017.7

摘要

对三角帆蚌HSP70基因序列进行全长克隆及其分子生物学分析,并检测其在不同水温刺激下鳃组织中的表达变化。通过高通量转录组测序获得三角帆蚌HSP70基因(HcHSP70)长片段,采用3′RACE对其进行了3′末端克隆,经拼接得到HcHSP70 cDNA全长序列。采用多种分子生物学软件对HcHSP70 cDNA全长序列进行了特征分析,采用实时荧光定量PCR技术检测了其组织分布,并结合Western-blot技术检测蚌鳃中该基因mRNA与蛋白经不同水温刺激后的表达变化。结果显示, HcHSP70 cDNA全长为2298 bp,其中开放阅读框为1974 bp,编码657个氨基酸。预测分子量大小为71.6 Ku, pH7.0时的理论等电点为5.61。氨基酸序列分析表明, HcHSP70氨基酸序列含HSP70家族的3个标签序列(I9DLGTTYS16、I197FDLGGGTFDVSIL210和I336 VLVGGSTRIPKVQK350),与长牡蛎及泥蚶的HSP70同源性最高(91%)。实时荧光定量PCR检测结果显示, HcHSP70在鳃、性腺、肝胰腺、外套膜及肌肉等5种被检组织中均有表达,以肝胰腺中的表达水平最高。实时荧光定量PCR与Western-blot技术检测皆表明,蚌鳃组织中HcHSP70基因与蛋白的表达量在37℃时达到最高,而在40℃水温刺激下表达水平下调至正常值,表明其在适应高温刺激时发挥了重要作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	隗黎丽	江西农业大学动物科学学院	34	170	8.0	11.0
2	刘毅	江西师范大学生命科学学院	16	49	5.0	6.0
3	吴圣楠	江西师范大学生命科学学院	4	19	2.0	4.0
4	付建平	江西师范大学生命科学学院	6	3	1.0	1.0
5	李海军	江西师范大学生命科学学院	3	12	2.0	3.0