三角帆蚌肌球蛋白必需轻链基因(MELC)的cDNA全长克隆与表达分析

• 作者: 刘广绪 徐宾朋 王岩 胡杭娇 舒妙安 郭晓令 陆晶莹
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 三角帆蚌 肌球蛋白必需轻链 RACE 实时荧光定量PCR 组织表达
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 764-774
• 页数: 11页
• 字数: 7361字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2013.07.002

摘要

肌球蛋白必需轻链基因是EF-hand钙结合蛋白家族的成员,具有很强的Ca2+结合活性.为了研究三角帆蚌钙代谢基因调控机制,本研究采用同源克隆策略和RACE技术,从三角帆蚌外套膜组织中成功克隆得到肌球蛋白必需轻链基因(myosin essential light chain,MELC)的全长cDNA序列,共1119bp,开放阅读框468 bp(47～514),编码155个氨基酸,相对分子量为17.49 kD,理论等电点为4.53,基因序列提交GenBank的登录号为JX275828.通过PROSITE tools软件预测显示三角帆蚌MELC基因有一对保守的EF-hand结构域,可结合Ca2+,属于EF-hand钙结合蛋白家族.同源性比对分析显示,三角帆蚌MELC基因与合浦珠母贝(Pinctada fucata)、太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)、盘鲍(Haliotis discus discus)等海水贝类的MELC基因同源性最高,依次为69％、69％和68％.经实时荧光定量PCR检测,发现MELC基因在闭壳肌、外套膜、鳃、斧足、性腺、心脏、肝脏、肠等8个组织中均有表达,其中在外套膜、鳃和斧足等与贝类钙代谢相关的组织中表达量远高于肝脏、肠等消化器官,预示MELC基因可能参与三角帆蚌的钙代谢过程.不同Ca2+浓度处理实验的结果表明,随着水体中Ca2+浓度逐渐升高,三角帆蚌MELC基因在外套膜中的表达量呈先上调后下降的趋势,在60 mg/L时达到最高值,表明适宜的Ca2+浓度可以刺激MELC基因大量表达,而过高或过低的Ca2+浓度均会抑制MELC基因表达.实验结果表明三角帆蚌MELC基因与Ca2+吸收、转运与贮存相关,可能参与珍珠等生物矿化过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王岩	浙江大学动物科学学院	51	467	13.0	19.0
2	郭晓令	浙江大学动物科学学院	36	267	9.0	15.0
3	舒妙安	浙江大学动物科学学院	44	942	16.0	30.0
4	胡杭娇	浙江大学动物科学学院	6	43	4.0	6.0
5	徐宾朋	浙江大学动物科学学院	4	20	3.0	4.0
6	刘广绪	浙江大学动物科学学院	8	56	5.0	7.0
7	陆晶莹	浙江大学动物科学学院	2	8	1.0	2.0