胸腺肤α1-Spl DnaX内含肤融合蛋白的切割动力学研究

• 作者: 戴红梅 方宏清 曹赛 李树龙 谢迟
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: Spl DnaX内含肤 胸腺肤αl 融合蛋白 切割
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 497-500
• 分类号: Q78|Q502
• 字数: 2957字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.04.010

摘要

目的:研究胸腺肤α1(Tal)与Spl DnaX内含肤融合蛋白AS的体外切割动力学.方法:构建Tαl和SplDnaX内含肤的融合表达载体pET-AS,转化大肠杆菌BL21(DE3),经乳糖诱导获得可溶性表达的融合蛋白AS,用镍亲和层析纯化该蛋白;综合评价温度、β-巯基乙醇(β-ME)浓度和诱导切割时间对Spl DnaX内含肤介导融合蛋白AS自切割释放Tα1的影响.结果:在大肠杆菌中诱导表达了融合蛋白AS,经镍柱纯化获得该蛋白;随着温度升高和β-ME浓度增加,诱导切割时间延长,Spl DnaX内含肤介导的切割率逐渐增大;最终采用300mmol/L β-ME切割24 h,融合蛋白的硫解切割率大于90%.结论:通过对Spl DnaX内含肤的诱导切割条件进行摸索,确定了最适宜的切割条件,为利用该方法制备Tαl和其他小分子多肤提供了技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方宏清	军事医学科学院生物工程研究所	42	245	8.0	13.0
2	戴红梅	军事医学科学院生物工程研究所	19	88	6.0	8.0
3	李树龙	军事医学科学院生物工程研究所	7	35	3.0	5.0
4	曹赛	湖南农业大学生物安全科学技术学院	1	0	0.0	0.0
8	谢迟	湖南师范大学生命科学学院	5	8	2.0	2.0