陕西烟区烟草脉带花叶病毒外壳蛋白基因的克隆和原核表达

• 作者: 刘萍 吴云锋 成巨龙 纪玲玲 郝兴安
• 来源期刊: 中国烟草学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草脉带花叶病毒 外壳蛋白 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 87-89,95
• 分类号: S572.03
• 字数: 2397字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5708.2011.05.015

摘要

根据烟草脉带花叶病毒(TVBMV)CP序列合成上下游引物,利用RT-PCR方法获得了(TVBMV)CP基因.序列分析表明,TVBMV CP基因全长813nt,编码271个氨基酸；与GenBank中已报道的9个分离CP基因相比,其核苷酸及氨基酸序列同源性分别为90.28％-98.15％和97.05 ％-100％.将TVBMV CP基因经Bam HI/ NotI双酶切定向插入到pET30a载体中,构建了原核表达载体pET30-TVBMV CP,重组质粒经BamHI和NotI双酶切鉴定及基因测序验证正确后,用IPTG进行诱导表达.结果表明:TVBMV CP在大肠杆菌中获得了高效表达,表达产物的分子量为37 kD.用表达产物为抗原免疫家兔制备了特异性抗血清,其效价为1/2048.用Western-blot检测田间样品,其结果表明,制备的抗血清可用于检测田间的发病植株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴云锋	西北农林科技大学植保学院	68	666	14.0	22.0
2	成巨龙		33	215	8.0	12.0
3	郝兴安	西北农林科技大学植保学院	17	130	6.0	11.0
4	纪玲玲	西北农林科技大学植保学院	2	8	2.0	2.0
5	刘萍	西北农林科技大学植保学院	6	71	4.0	6.0