鱼藤素对乳腺癌细胞株MCF-7增殖和凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响

• 作者: 初钊辉 周鑫莉 梁晓华 蒋京伟 詹琼 黄若凡
• 来源期刊: 中西医结合学报
• 学科: 医学
• 关键词: 鱼藤素 1-磷脂酰肌醇3-激酶 Akt 细胞增殖 细胞凋亡 MCF-7细胞株 体外实验
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 实验论著
• 页码范围: 533-538
• 分类号: R737.9
• 字数: 4694字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3736/jcim20110511

摘要

目的:观察鱼藤素对MCF-7细胞株细胞增殖和凋亡及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B (phosphatidvlinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路的影响,旨在研究其抗肿瘤机制.方法:细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK8)检测0、1、5、10、15和20μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72 h后对MCF-7细胞增殖的影响,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡率,透射电子显微镜观察细胞凋亡形态,蛋白质印迹法检测细胞内PI3K/Akt通路相关分子的蛋白表达.结果:5、10、15和20 μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72 h后能明显抑制MCF-7细胞增殖(P＜0.01),抑制率随着浓度升高和时间延长而增加,各组间两两比较差异有统计学意义(P＜0.05);而1μmol/L鱼藤素作用6、24、48和72 h后对MCF-7细胞的增殖无明显影响(P＞0.05).5、10、15和20 pmol/L鱼藤素作用6 h后能诱导MCF-7细胞凋亡,透射电子显微镜下可观察到典型的凋亡细胞形态,而相同条件下1μmol/L鱼藤素对MCF-7细胞的凋亡诱导作用不明显.5μmol/L鱼藤素作用6 h后,MCF-7细胞内磷酸化Akt(p-Akt)(Thr308)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phosphorylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)(Ser9)、磷酸化磷酸肌醇依赖性激酶1(phosphorylated 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1,p-PDK1)(Ser241)和磷酸化人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因编码的蛋白(phosphorylated phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,p-PTEN)(Ser380)的表达量明显减少,而总Akt蛋白的表达量则无明显变化;1μmol/L鱼藤素作用6 h后,细胞内上述所有蛋白的表达量均无明显变化.结论:鱼藤素可能通过抑制PTEN(Ser380)和PDK1(Ser241)蛋白的磷酸化,进而抑制Akt(Thr308)的磷酸化,间接抑制其下游GSK-3β(Ser9)的磷酸化,最终诱导MCF-7细胞凋亡和抑制其增殖.