基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取       
摘要:
根据猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)VR2332株ORF7的全长基因序列设计一对特异性引物,应用RT-PCR扩增出完整的ORF7基因,并将PCR产物克隆至pMD-18T载体进行测序分析.双酶切测序后重组质粒pMD-18T-N得到目的片段连接至原核表达载体pET-28a(+)上,构建重组质粒pET-28a(+)-N.再转化至BL21宿主菌,对诱导表达条件(IPTG质量浓度、诱导时间、诱导温度)进行优化.结果显示,在37 ℃、0.2 mmol/L IPTG诱导5 h可实现重组N蛋白的高效表达.该重组N蛋白经Ni-NTA亲和层析柱纯化后,Western-blotting分析显示,重组的N蛋白与PRRSV阳性血清发生特异性反应,表明表达的重组N蛋白具有较好的反应活性.
推荐文章
猪繁殖与呼吸综合征病毒山西分离株ORF7基因序列分析
猪繁殖和呼吸综合征病毒
ORF7基因
序列分析
福建地区猪繁殖与呼吸综合征ORF7基因遗传变异分析
猪繁殖与呼吸综合征病毒
ORF7基因
遗传变异
猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ-4株ORF3基因的原核表达
猪繁殖与呼吸综合征病毒
ORF3基因
原核表达
猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的原核表达和间接ELISA方法的建立
猪繁殖与呼吸综合征病毒
N蛋白
重组表达
间接ELISA
内容分析
关键词云
关键词热度
相关文献总数  
(/次)
(/年)
文献信息
篇名 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因的克隆、高效表达与鉴定
来源期刊 大连工业大学学报 学科 生物学
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 核衣壳蛋白基因(ORF7) 基因克隆 原核表达
年,卷(期) 2011,(1) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 18-22
页数 分类号 Q786
字数 2822字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-1404.2011.01.005
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 吴斌 59 317 10.0 15.0
2 贾赟 33 159 7.0 11.0
3 肇慧君 20 52 4.0 6.0
4 张瑞 河南农业大学牧医工程学院 14 71 5.0 8.0
5 张秀云 大连工业大学生物工程学院 2 3 1.0 1.0
6 刘霞 1 1 1.0 1.0
传播情况
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献  (0)
共引文献  (8)
参考文献  (5)
节点文献
引证文献  (1)
同被引文献  (6)
二级引证文献  (0)
1997(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
1998(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
2002(2)
  • 参考文献(2)
  • 二级参考文献(0)
2003(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
2011(0)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(0)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(0)
2014(1)
  • 引证文献(1)
  • 二级引证文献(0)
研究主题发展历程
节点文献
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)
核衣壳蛋白基因(ORF7)
基因克隆
原核表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
大连工业大学学报
双月刊
1674-1404
21-1560/TS
大16开
大连市甘井子区轻工苑1号
1981
chi
出版文献量(篇)
2178
总下载数(次)
2
论文1v1指导