实时定量PCR法绝对定量检测大鼠肝脏CYP3A1和CYP3A2mRNA的诱导表达

• 作者: 卢炜 周田彦 李博 李汉青 李良 李载权 毕姗姗 许娇娇
• 来源期刊: 中国药学（英文版）
• 学科: 医学
• 关键词: 实时定量PCR CYP3A1 CYP3A2 mRNA 地塞米松 诱导作用
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 597-603
• 页数: 7页
• 分类号: R945
• 语种: 英文
• DOI: 10.5246/jcps.2011.06.077

摘要

由CYP3A诱导作用引起的临床药物-药物间相互作用能同时降低CYP3A酶底物药物的体内暴露量和药理活性.CYP3A mRNA水平的增高常用于评价受试化合物对CYP3A酶的诱导作用.本实验建立并验证了一种绝对定量的实时PCR方法用于测定大鼠肝中CYP3A1和CYP3A2 mRNA的表达水平.设计的CYP3A1、CYP3A2和GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶,看家基因)引物具有很高的特异性.CYP3A1、CYP3A2和GAPDH在1-1×106 attomol/μL浓度范围内,循环阈值和对数浓度呈现良好的线性关系,并且具有良好的实验组内和组间可重复性.该方法成功应用于考察大鼠腹腔注射给予100 mg/kg地塞米松后肝脏中CYP3A1和CYP3A2 mRNA诱导作用随时间的变化规律.总RNA中CYP3A1和CYP3A2mRNA的基础水平分别为37.78和252.31 attomol/μg.随后CYP3A1和CYP3A2 mRNA水平逐渐增加并分别在24小时和42小时达到最大诱导效应,分别为基础水平的19倍和8倍.最终CYP3A1和CYP3A2 mRNA在地塞米松给药60小时后回落到各自的基础水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李良		54	261	10.0	12.0
2	李博		24	503	8.0	22.0
3	李载权		19	232	6.0	15.0
4	卢炜		84	367	11.0	16.0
5	周田彦		33	39	3.0	6.0
6	毕姗姗		9	61	4.0	7.0
7	许娇娇		4	0	0.0	0.0
8	李汉青		4	0	0.0	0.0