成团泛菌对玉米自交系PS056致病性基因yhfK的克隆

• 作者: 任争光 张力群 曹慧英 朱振东 李洪杰 王晓鸣
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 成团泛菌 Tn5转座子 玉米 细菌性干茎腐病 yhfK
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 299-306
• 分类号: S432.42
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.02.009

摘要

[目的]通过克隆和鉴定成团泛菌(Pantoea agglomerans)的致病相关基因,阐明该种土壤习居细菌在玉米自交系PS056上引起细菌性干茎腐病的原因.[方法]利用转座子Tn5的随机插入突变特点,构建致病性菌株P.agglomerans XJ1突变体库;经对Tn5插入位点的侧翼扩增,确认突变体PA121的致病力相关基因;通过基因互补试验,证明yhfK与致病力的关系.[结果]通过对突变菌株的接种筛选,获得11个致病力丧失的突变体.Southern杂交和PCR扩增结果表明,Tn5在突变体PA121中为单拷贝插入,插入位点为细菌编码内膜蛋白的yhfK(Tn5插入在yhfK的1 082 bp处).将yhfk克隆到质粒pBBRIMCS上,并导入突变体PA121中进行互补,生物测定结果显示转化子完全恢复了正常的细菌生理功能,并能够在玉米自交系PS056上恢复致病力.RT-PCR试验证明,yhfK调控hrpA的转录.[结论]成团泛菌XJ1中yhfk是调控其对植物致病性的基因之一,具有在玉米自交系PS056上引起细菌性干茎腐病的功能.