M122蛋白与宿主因子Myst4的相互作用位点

• 作者: 刘兴楼 张菊 方峰 李革 王慧 舒赛男
• 来源期刊: 实用儿科临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 巨细胞病毒 M122蛋白 Myst4 酵母双杂交分析
• 年，卷（期）: 2011,（22）
• 所属期刊栏目: 感染性疾病
• 页码范围: 1702-1705
• 分类号: R729
• 字数: 3780字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-515X.2011.22.004

摘要

目的 明确M122蛋白与宿主因子Myst4相互作用的位点.方法 以诱饵载体pGBKT7-M122为模板,采用PCR方法扩增不同长度大小的M122基因片段,并将其分别插入至pMD-T simple载体,构建含有不同长度M122基因片段的重组质粒.将构建成功的各个重组质粒分别用限制性内切酶EcoRI和SalI进行双酶切鉴定,并送测序.将测序正确的重组质粒采用同样的内切酶进行双酶切,凝胶回收试剂盒回收不同长度大小的M122基因片段,并将其分别亚克隆至pGBKT7-BD载体构建含有不同长度M122基因片段的诱饵质粒.将构建成功的各个诱饵质粒分别用限制性内切酶EcoRI和SalI进行双酶切鉴定,并送测序.将测序正确的各个诱饵质粒分别与pGADT7 -Myst4质粒共同转化至酵母菌株AH109感受态细胞,转化后的酵母细胞分别涂板于营养缺陷培养基SD/-Trp/-Leu和SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/X-α-Gal平板.M122与宿主因子Myst4相互作用的位点通过营养缺陷筛选确定.结果 成功扩增了编码不同M122蛋白突变体的基因片段,并将其正确插入诱饵载体,构建了含有不同长度大小M122基因片段的诱饵质粒；通过酵母双杂交筛选明确了M122蛋白与宿主因子Myst4相互作用的结合位点位于M122蛋白的1～ 148氨基酸.结论 M122蛋白的1～ 148氨基酸是其与宿主因子Myst4相互作用所必需的,为研究M122蛋白在MCMV致神经系统损伤的分子机制中的作用提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王慧	华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科	44	281	9.0	15.0
2	刘兴楼	华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科	25	65	5.0	6.0
3	舒赛男	华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科	67	226	8.0	11.0
4	方峰	华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科	142	890	16.0	23.0
5	李革	华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科	28	159	7.0	11.0
6	张菊	华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科	7	41	3.0	6.0