中国特有植物血水草RAPD反应体系的优化

• 作者: 廖信军 肖宜安 胡雪华 郭永久 陈香 鞠建文
• 来源期刊: 植物研究
• 学科: 农学
• 关键词: RAPD 反应体系 优化 血水革
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 89-94
• 页数: 6页
• 分类号: S567.23
• 语种: 中文

摘要

为建立血水草的RAPD-PCR最佳反应体系,对影响血水草RAPD反应的Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物浓度和Taq聚合酶用量等因素进行优化.结果表明:25μL反应体系中含10×Buffer 2.5μL,1.8 mmol·L-1 Mg2+,2U TaqDNA聚合酶,50 ng模板,0.2 mmol·L-1 dNTPs,1.6 μmol·L-1引物.扩增程序为:94℃预变性2 min;预扩增:94℃变性20 s,36℃退火30 s,72℃延伸75 s,5个循环;扩增:94℃变性20 s,40℃退火30 s,72℃延伸60 s,加个循环;72℃保温20 min,4℃保存.所建立的血水草RAPD-PCR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力强、重复性好等特点,可以较好地应用于血水草的遗传多样性分析研究.