大鼠细小病毒H-1株培养方法的建立

• 作者: 仉惠敏 佟巍 刘云波 刘先菊 张丽芳 王艳蓉 荣蓉 高子琪
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 细小病毒 大鼠胶质瘤细胞 大鼠原代胚细胞 免疫荧光试验 血球凝集试验
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 495-498
• 分类号: Q95-33
• 字数: 3399字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2011.06.009

摘要

目的 建立用大鼠胶质瘤细胞系(Rat glial cell line C6)替代大鼠原代胚细胞( primary rat embryo cells,RE)培养大鼠细小病毒(Toolan virus,H-1)的方法.方法 将0.8mLH-1病毒接种C6细胞(75T培养瓶,细胞接种量为2×105/mL,培养过夜),待细胞病变CPE达++～+++时,用免疫荧光(FITC)鉴定所培养病毒的抗原,用血球凝集试验(HA)测定培养物上清效价,用DNA测序鉴定所培养的病毒,用96孔板培养法测定H-1病毒的TCID50.结果H-1在接种到C6细胞的第3～4天,细胞发生明显的病变,CPE可达++++,FITC鉴定呈H-1抗原阳性,病毒的培养上清中HA效价为1:320.测序结果表明:该病毒序列与NCBI中H-1序列同源性达99％,确定为H-1病毒.收获的H-1的TCID50为103.2/0.1 mL.结论用大鼠胶质瘤细胞系(C6)可以替代大鼠原代胚细胞(RE)进行大鼠细小病毒的培养.