大鼠细小病毒双重PCR检测方法的建立

• 作者: 丛锋 伍妙梨 刘助红 刘向楠 尹雪琴 张钰 徐凤娇 朱余军 王静 练月晓 袁文 郭鹏举 饶丹 黄碧洪 黄韧
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 农学
• 关键词: 大鼠细小病毒(RPV) H-1 KRV RMV 双重PCR
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 32-35
• 页数: 4页
• 分类号: S855.3|Q95-33
• 字数: 2290字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.01.007

摘要

目的 建立快速检测大鼠细小病毒的PCR方法.方法 根据大鼠细小病毒基因序列的特点,建立鉴别检测大鼠细小病-(RPV)与其他三种大鼠细小病毒(H-1、KRV、RMV)的双重PCR方法.根据RPV核酸序列的性质,在VP2基因筛选了一对用于特异扩增RPV株的引物,在NS1基因设计了一对用于特异性扩增H-1,KRV和RMV的引物.结果 两对引物组成的二重PCR方法可以特异性的扩增RPV而不扩增核酸同源性高的小鼠细小病毒和多种其他病原微生物;敏感性实验表明,二重PCR的最低检测限可达1 000拷贝/μL.双重PCR结合测序在检测23份临床样本中,检测出7份RMV阳性,包括1份与RPV共感染阳性样本.结论 本研究建立的检测RPV的双重PCR方法具有特异性好、灵敏度高及操作简单等优点,是一种简便、可靠的检测方法.