大鼠微小病毒和细小病毒双重荧光定量PCR检测方法建立

• 作者: 孙竹筠 张泉 李泽君 熊炜 蔡骁垚 陈懿斐 陈鸿军 魏晓锋
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 大鼠微小病毒(RMV) 大鼠细小病毒(RPV) TaqMan探针 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 372-377
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 3013字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2017.05.006

摘要

目的 建立快速、准确地同时检测和鉴别大鼠细小病毒(RPV)和大鼠微小病毒(RMV)的双重TaqMan实时荧光定量PCR方法.方法 根据GenBank中已公布的RMV NTU1株全基因组序列(JX627317.1),在1 705～1 808 nt处设计引物和TaqMan探针,根据RPV NTU1毒株的全基因组序列(JX827169),在863-967nt处设计引物和TaqMan探针.以构建的质粒参考物为模板建立荧光定量PCR检测方法,并对该鉴别检测方法的灵敏度、稳定性和特异性进行评价;用建立的荧光定量方法对50份临床样品进行检测,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)的商品试剂盒进行验证.结果 建立的RMV和RPV的鉴别荧光定量PCR方法标准曲线的线性关系良好,R2值可达0.99,最低检测限均为10拷贝数/μL;应用鉴别荧光定量PCR方法和ELISA检测试剂盒,对100份大鼠肝脏和50份血清样品病料进行检测,结果均为阴性.结论 建立的RMV和RPV的TaqMan实时荧光定量PCR方法具有特异、灵敏的特点,适用于RMV和RPV的临床监测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张泉	扬州大学兽医学院	51	346	8.0	17.0
2	熊炜		37	146	7.0	9.0
3	李泽君	中国农业科学院上海兽医研究所	24	420	6.0	20.0
4	魏晓锋		30	60	4.0	5.0
5	蔡骁垚	中国农业科学院上海兽医研究所	4	22	1.0	4.0
9	陈懿斐		6	10	1.0	3.0
10	陈鸿军	中国农业科学院上海兽医研究所	57	114	6.0	8.0
11	孙竹筠	中国农业科学院上海兽医研究所	4	1	1.0	1.0